生物安全柜是为操作原代培养物、菌毒株以及诊断性标本等具有感染性的实验材料时，用来保护操作者本人、实验室环境以及实验材料，使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感染性气溶胶和溅出物而设计的。
使用单位和操作人员应当对生物安全柜的性能充分了解，才能购买到放心的生物安全柜，来保障操作人员的的人身安全！
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一、名词解释
1．气溶胶：是指悬浮于气体介质中、粒径一般为0.001μm～100μm的固态、液态微粒所形成的胶溶态分散体系。
2．NSF49：即美国国家卫生基金会的第49号标准(National Sanitation Foundation standard number 49,NSF49)，是目前世界上生物安全柜领域最重要的标准之一。
3．HEPA过滤器：即高效空气过滤器(high-efficiency particulate air filter, HEPA filter)。绝大多数HEPA过滤器采用特殊防火材料制成框架，框架内被波纹状的铝片分隔成栅状，里面填充乳化玻璃纤维亚微粒。HEPA过滤器的过滤效率可达99.99%～100%，是生物安全柜的主要生物防护结构。
4．Ⅰ级生物安全柜：是指用于保护操作人员与环境安全、而不保护样品安全的通风安全柜。适用于对处理样品安全性无要求且生物危险度等级为1、2、3的媒质的操作。
5．Ⅱ级生物安全柜：是指用于保护操作人员、处理样品安全与环境安全的通风安全柜。Ⅱ级生物安全柜通常适用于生物危险度等级为1、2、3的媒质的操作。
6．Ⅲ级生物安全柜：是完全密闭、不漏气结构的通风安全柜。Ⅲ级生物安全柜适用于生物危险度等级为1、2、3和4的媒质的操作。
7．生物安全等级1级(P1)微生物：生物安全等级1级(P1)的媒质是指普通无害细菌、病毒等微生物。
8．生物安全等级2级(P2)微生物：生物安全等级2级(P2)的媒质是指一般性可致病细菌、病毒等微生物。
9．生物安全等级3级(P3)微生物：生物安全等级3级(P3)的媒质是指烈性/致命细菌、病毒等微生物，但感染后可治愈。
10．生物安全等级4级(P4)微生物：生物安全等级4级(P4)的媒质是指烈性/致命细菌、病毒等微生物，感染后不可治愈。
11．Ⅱ级A1型生物安全柜：为Ⅱ级生物安全柜的类型之一。性能特征为：(1)维持穿过工作台开口面的最小平均吸入口风速为0.38m/s(75ft/min)；(2)柜内70%气体通过HEPA过滤器再循环至工作区，30%的气体通过排气口HEPA过滤器过滤排除；(3)允许过滤后的气流返回实验室；(4)允许有正压的污染风道和静压箱。
12．Ⅱ级B1型生物安全柜：为Ⅱ级生物安全柜的类型之一。性能特征为：(1)维持穿过工作台开口面的最小平均吸入口风速为0.5m/s(100ft/min)(2)柜内70%气体通过排气口HEPA过滤器排除，30%的气体通过供气口HEPA过滤器再循环至工作区；(3) 过滤后的垂直气流，通过专用风道过滤后排入大气；(4)所有被生物污染的风道和静压箱应保持负压，或被负压的风道和静压箱包围。
13．Ⅱ级B2型生物安全柜：为Ⅱ级生物安全柜的类型之一，也称为“全排”型。性能特征为：(1)维持穿过工作台开口面的最小平均吸入口风速为0.5m/s(100ft/min)(2)安全柜中排出的气体不进入垂直气流的循环过程；(3)所有的吸入气流和垂直气流经HEPA过滤器过滤后排入大气，不再进入安全柜循环或返回实验室；(4)所有污染的风道和静压箱应保持负压，或是被直接排风的风道和静压箱包围。
14．Ⅱ级A2型生物安全柜：为Ⅱ级生物安全柜的类型之一。性能特征为：(1)维持穿过工作台开口面的最小平均吸入口风速为0.5m/s(100ft/min)(2)柜内30%气体通过排气口HEPA过滤器排除，70%的气体通过供气口HEPA过滤器再循环至工作区；(3)废气经过滤后才能排到室外，不可再进入安全柜循环或返回实验室；(4)所有被生物污染的风道和静压箱应保持负压或者被负压的风道和静压箱包围。
15．生物安全柜(biosafety cabinet；biological safety cabinet)：生物安全柜是防止操作处理过程中某些含有危险性或未知性生物微粒发生气溶胶散逸的箱形空气净化负压安全装置。
二、简答题
1. 生物安全柜的工作原理是什么？
答：生物安全柜是防止操作处理过程中某些含有危险性或未知性生物微粒发生气溶胶散逸的箱形空气净化负压安全装置。其工作原理主要是将柜内空气向外抽吸，使柜内保持负压状态，通过垂直气流来保护工作人员；外界空气经高效空气过滤器过滤后进入安全柜内，以避免处理样品被污染；柜内的空气也需经过HEPA过滤器过滤后再排放到大气中，以保护环境。
2. 目前世界上生物安全柜领域最重要的两个标准是什么？
答：目前世界上生物安全柜领域执行的最重要的标准是欧洲标准EN12469和美国国家卫生基金会的第49号标准(National Sanitation Foundation standard number 49,NSF49)。
3. 按照美国1992年版NSF49标准，生物安全等级分别为1、2、3、4的微生物是如何界定的？
答：按照美国1992年版NSF49标准，生物安全等级1级(P1)的媒质是指普通无害细菌、病毒等微生物；生物安全等级2级(P2)的媒质是指一般性可致病细菌、病毒等微生物；生物安全等级3级(P3)的媒质是指烈性/致命细菌、病毒等微生物，但感染后可治愈；生物安全等级4级(P4)的媒质是指烈性/致命细菌、病毒等微生物，感染后不可治愈。
4. 简述Ⅰ级生物安全柜的性能特点。
答：Ⅰ级生物安全柜是指用于保护操作人员与环境安全、而不保护样品安全的通风安全柜。适用于对处理样品安全性无要求且生物危险度等级为1、2、3的媒质的操作。因为不考虑处理样品是否会被进入柜内的空气污染，故对进入柜内的空气洁净度要求不高；空气的流动为单向、非循环式，空气流经HEPA过滤器后进入柜内，通过工作台面后又被过滤、经排气口排出；为了保护操作人员和环境，其向内的非循环吸入气流必须远离操作者；安全柜中的气体在外排到大气以前必须先经过HEPA过滤器过滤。
5. 简述Ⅱ级生物安全柜的共同性能特点。
答：Ⅱ级生物安全柜是指用于保护操作人员、处理样品安全与环境安全的通风安全柜。为了保护操作人员的安全、处理样品的安全和保护环境，柜内保持负压状态，位于前部操作窗口开口区域的气流由于存在压力差而向内吸入；从安全柜顶部垂直吹下的气流为经HEPA过滤器过滤的净化空气；安全柜排出的气体须经HEPA过滤器过滤后再排放到大气中。Ⅱ级生物安全柜通常适用于生物危险度等级为1、2、3的媒质的操作。当有毒化学物质或放射性核物质被用作微生物研究或制药的添加物时，应使用专为此目的设计制造的II级生物安全柜。
6. 简述Ⅱ级A1型生物安全柜的性能特点。
答：(1)维持穿过工作台开口面的最小平均吸入口风速为0.38m/s(75ft/min)；(2)由静压箱送出的，经HEPA过滤器过滤的垂直气流是垂直气流和吸入气流混合后的一部分(即柜内70%气体通过HEPA过滤器再循环至工作区，30%的气体通过排气口HEPA过滤器过滤排除)(3)允许经排出口HEPA过滤器过滤后的气流返回实验室；(4)允许有正压的污染风道和静压箱。
7. 简述Ⅱ级B1型生物安全柜的性能特点。
答：(1)维持穿过工作台开口面的最小平均吸入口风速为0.5m/s(100ft/min)(2)经HEPA过滤器过滤后的垂直气流中的绝大部分是由未污染的循环吸入气流组成(即柜内70%气体通过排气口HEPA过滤器排除，30%的气体通过供气口HEPA过滤器再循环至工作区)(3) 经HEPA过滤器过滤后的大部分污染的垂直气流，通过专用风道过滤后排入大气；(4)所有被生物污染的风道和静压箱应保持负压，或被负压的风道和静压箱包围。
8. 简述Ⅱ级B2型生物安全柜的性能特点。
答：Ⅱ级B2型生物安全柜也称为“全排”型，其性能特点包括：(1)维持穿过工作台开口面的最小平均吸入口风速为0.5m/s(100ft/min)(2)经HEPA过滤器过滤后的垂直气流是由实验室或室外空气送入的(即：安全柜中排出的气体不进入垂直气流的循环过程)(3)所有的吸入气流和垂直气流经HEPA过滤器过滤后排入大气，不再进入安全柜循环或返回实验室；(4)所有污染的风道和静压箱应保持负压，或是被直接排风的风道和静压箱包围。B2型生物安全柜适用于处理感染性样品、使用挥发性有毒化学物质和以放射性核素作为微生物学研究的工作场合。
9. 简述Ⅱ级A2型生物安全柜的性能特点。
答：(1)维持穿过工作台开口面的最小平均吸入口风速为0.5m/s(100ft/min)(2)经HEPA过滤器过滤后的垂直气流是由静压箱排出的垂直气流和吸入气流混合后的一部分(即柜内30%气体通过排气口HEPA过滤器排除，70%的气体通过供气口HEPA过滤器再循环至工作区)(3)必须经HEPA过滤器过滤后，所有废气才能排到室外，但废气不可再进入安全柜循环或返回实验室；(4)所有被生物污染的风道和静压箱应保持负压或者被负压的风道和静压箱包围。
10. 简述Ⅲ级生物安全柜的性能特点。
答：Ⅲ级生物安全柜是完全密闭、不漏气结构的通风安全柜。工作空间内为经HEPA过滤器净化的无涡流的单向流空气。安全柜正面上部为观察窗，下部为手套箱式操作口。在安全柜内的操作是通过与安全柜相连接的橡皮手套进行的。安全柜应维持至少120Pa的负压，方可确保人体与柜内物品完全隔绝。进入气流经数个HEPA过滤器过滤后送入安全柜，排出气流应经双层HEPA过滤器过滤或通过HEPA过滤器过滤和焚烧来处理。Ⅲ级生物安全柜适用于生物危险度等级为1、2、3和4的媒质的操作。
11. 简述生物安全柜的基本结构。
答：生物安全柜一般均由箱体和支架两部分组成。箱体包括空气过滤系统、外排风箱系统、前玻璃门驱动系统、紫外光源、照明光源和控制面板等。
12. 简述生物安全实验室选用生物安全柜的原则。
答：如下表所示：
实验室级别
生物安全柜选用原则
一级
一般无须使用生物安全柜，或使用Ⅰ级生物安全柜
二级
当可能产生微生物气溶胶或出现溅出的操作时，可使用I级生物安全柜；当处理感染性材料时，应使用部分或全部排风的Ⅱ级生物安全柜；若涉及处理化学致癌剂、放射性物质和挥发性溶媒，则只能使用Ⅱ-B级全排风(B2型)生物安全柜。
三级
应使用II级或Ⅲ级生物安全柜；所有涉及感染材料的操作，应使用全排风型Ⅱ-B级(B2型)或Ⅲ级生物安全柜。
四级
应使用Ⅲ级全排风生物安全柜。当人员穿着正压防护服时，可使用Ⅱ-B级生物安全柜。
13. 生物安全柜内实验操作时应注意哪些主要事项？
答：①平行摆放柜内物品 应尽量呈一字横向摆开；同时应注意正前方和背部的回风隔栅上均不能摆放物品，以免堵塞回风隔栅、影响正常风路；②操作宜缓慢 手臂应缓慢移动，避免影响正常的气流。操作完毕后，应将手臂从柜内缓慢抽出，避免将柜内污染空气带出；③柜内移动物品时应尽量避免交叉污染 柜内有两种及以上物品需要移动时，需按照低污染物品向高污染物品移动的原则；④避免震动 尽量避免使用可产生震动的仪器，以免使积留在滤膜上的颗粒物质抖落，导致柜内洁净度降低。同时有些仪器的散热片排风口气流还可能影响柜内的正常气流方向；⑤柜内尽量不要使用明火 否则产生的细小颗粒杂质会被带入滤膜，这些高温杂质会损伤滤膜。若必需使用明火时，应使用低火苗的本生灯。
14. 哪些情况下应对生物安全柜进行现场检测？
答：①生物安全实验室竣工后，投入使用前，生物安全柜已安装完毕；②生物安全柜被移动位置；③对生物安全柜进行检修；④生物安全柜更换HEPA过滤器后；⑤生物安全柜一年一度的常规检测。
15. 生物安全柜进行现场检测应符合哪些要求？
答：检测应符合以下要求：
(1) 垂直气流平均风速检测 平均风速不低于0.25m/s，与生产厂家给定值之差不大于±0.025m/s，且单点风速与平均风速之差不大于±20%。
(2) 工作窗口的气流流向检测 工作窗口断面所有位置的气流均向内。
(3) 工作窗口的气流流速检测 其断面上的风速值均不低于产品标准要求。
(4)工作区洁净度检测 尘埃粒子数不得高于产品标准要求。
(5) 噪声检测 噪声不得高于产品标准要求。
(6)光照度检测 平均照度不低于产品标准要求。
(7)在有条件时应进行箱体的漏泄检测 可把生物安全柜密封并加压到500Pa的压力下用皂泡检漏。
